סוגיות איטום וזיהום בצלחות תרבית תאים רב -וול

העמסה וטיפול בצלחות תרבית תאים רב-בירות:

לוחית תרבית התאים עוקבת גם אחר העיקרון של אספסיס קפדני בעת ביצוע פעולות תאים. כל הפעולות חייבות להיות סטנדרטיות ומדעיות, ולא יגרמו להשפעה נוספת על צמיחת התאים. הבעיה הנפוצה ביותר היא כיצד להבטיח את אחידות התאים לאחר הוספת הדגימה ולמזער את ההשפעה של שינוי המדיום על מצב הצמיחה של התאים.

לִשְׁאוֹל:
המכסים של צלחות תרבות של 96 ו 24 בארות או מנות פטרי רופפות מאוד, וזה נוח לאוורור, אך האם חיידקים, עובש ומזהמים אחרים יחליקו פנימה גם?

תשובה:
המכסה רופף מאוד, השייך לתרבות פתוחה למחצה, והמטרה של זה היא לאוורר (למעשה, זה לגרום ל- CO2 מחוץ למנה התרבות להחליף באופן מלא עם צלחת התרבות ולשמור על ערך החומציות של התרבות בינוני).
לכל דבר יש יתרונות וחסרונות, שכמובן מגדילים את האפשרות לזיהום. בנוסף, זה גורם לנוזל במנה להתאדות, מה שמציע למינון מדויק של תרופות. לכן, שני המדדים הבאים נחוצים: א. האוויר בחממה חייב להיות נקי (אור אולטרה סגול רגיל, קרצוף אלכוהול, ויש לפתוח את החממה ולסגור כמה שפחות) ב. יש לשמור תמיד על הלחות בחממה ב 100% (הכיור עם מים מזוקקים סטריליים המונחים בחממה).
ממש כמו צלחת פטרי, זה גם מיכל עם מכסה הפוך, והוא לא יהיה מזוהם. בעיקר בגלל הלחץ השלילי של זרימת האוויר הנוצרת על ידי קצה "L" של הכיסוי, ישנם מיקרואורגניזמים המחוברים לאבק, והאבק הנישא על ידי זרימת האוויר לא יכול לעבור דרך קצה הכיסוי המייצר לחץ שלילי. אפקט האוורור הוא רק באמצעות התפשטות אוויר, ולא תיווצר זרימת אוויר, כך שהוא רק יישא ולא ידרור לחיידקים.

לִשְׁאוֹל:
בעזרת צלחת 24 בארות, יש פעולות בחלק מהבארות (בספסל הנקי האולטרה), ויש תאים שיש לטפח אותם בבארות אחרות. אני חושש שזה יגרום לזיהום. אני לא יודע למה לשים לב?

תשובה:
אם הפעולה מתוקנת בספסל הנקי במיוחד, זה אמור להיות בסדר. אני חושב שאתה יכול לעשות שימוש מלא בכיסוי צלחת התרבות, לנסות לחשוף רק את החורים שיופעלו ולכסות את שאר החורים בכריכות.
שקול באופן מקיף לפני השימוש והשתמש במלואם בכל החורים; אם אתה צריך להשתמש רק בכמה חורים, אתה יכול להשתמש רק בצד אחד ולכסות את השאר בכיסוי. אני רגיל להשתמש קודם בחור הנכון (נוח להוסיף דוגמאות ליד ימין).

בעת הפעלה, השתמש בכמה מגלשות זכוכית כדי להעלות צד אחד של הלוח, אל תפתח את הכיסוי לחלוטין, בדרך כלל אין בעיה.
הפצת תאים ופתרונות לא אחידים

לִשְׁאוֹל:
תאים מחוסנים בצלחת התרבות, והתאים תמיד מתכנסים בחלק ההיקפי, כיצד להתמודד עם זה?

תשובה:
האם אוכל לשאול כיצד התאים שלך מעורבים? האם זה מצנח או מטלטל את צלחת התרבות? אם זה האחרון, ואם הוא מטלטל במעגל, סביר להניח שהתאים יושלכו לחלק ההיקפי בגלל הכוח הצנטריפוגלי, וכתוצאה מכך פחות תאים באמצע. יותר מארבעה שבועות!
הנה דרך טובה: לפני טיפוח צלחת הזרעים, הכניסו את צלחת התרבות לחממה לכמה שעות של רוויה ואז הוציאו אותה. הכוח צריך להיות קל בעת נטיעת התאים. הוספת לאט מאפשרת לאט לאט להשעיית התא לזרום לבארות הצלחת, והתאים המתורבתים בעצם צומחים באופן שווה. זכור לעולם לא לנער עם שייקר, או שהתאים שלך יתגבשו יחד כמו שאמרת.
ככל שקוטר החור של צלחת התרבות קטן יותר, כך תופעה זו ברורה יותר. תופעה זו אינה נמנעת לצלחות 24 ו -96 בארות, מכיוון שהנוזל דבק בקיר כך שתמיסת התרבות בבאר אינה מהווה מפלס נוזלי, אך הפריפריה גבוהה, ממש כמו מראה קעור. עם זאת, בעת שימוש בשני סוגים אלה של צלחות פתח, לא ניתן להוסיף כמות מספקת של פתרון תרבות בגלל הצורך בהתערבות נוספת, כך שהתאים יופיעו "אוסף קצה" יחד עם פיתרון התרבות. זה תלוי באילו אינדיקטורים אתה צריך לצפות. אם מדובר ב- MTT, אימונוהיסטוכימיה תשפיע על התוצאות עקב שכבת תאים.
בעת עיכול תאים, שימו לב לפיזור באופן שווה כדי להימנע מגושי תאים, וכמות תמיסת התרבות בבאר צריכה להספיק. באופן כללי, הוסף מספיק פתרון תרבות בעת חיסון, ושנה את הפיתרון פעם אחת בעת הוספת התערבות. כמות הפיתרון של התרבות שנוספה לפיתרון ההתערבות שווה לכמות תמיסת התרבות בזמן החיסון, במקרה זה, תשתפר את התופעה של "מערך הקצה", כך שתוכל לנסות זאת.

לִשְׁאוֹל:
מה שעשיתי היה ניסוי היווצרות הלוח. עדיף להפיץ את התאים בשכבה אחידה. מרבית החורים בסדר כאשר הנגיף מחוסן, וחלקם אינם אחידים. ישנם הבדלים גדולים בקבוצת התאים. ברצוני לשאול אותך באיזו שיטה אתה משתמש בעת הוספת תאים?

תשובה:
זה קריטי לפיפטה את התאים להשעיה של תאים יחיד לאחר העיכול! וודא שמספר התאים בכל באר עקבי בעת פיצול הצלחת!
כמובן שיש גם גורמי עיבוד. ההקבלה בין הבארות חשובה מאוד. לדוגמה, בעת הוספת רפואה, מערבבים את התרופה לאחר דילול כדי להבטיח שהריכוז של כל באר יהיה עקבי!
יתר על כן, בעת הוספת תאים ותרופות, יש להוסיף את קבוצת הבדיקה וקבוצת הביקורת בתורם כדי למנוע את ההבדל בצפיפות התאים וריכוז התרופות הנגרמות על ידי רצף הוספת דגימות!

לִשְׁאוֹל:
הנשף כבר אחיד, אבל הקרש, 6 חורים ו -24 חורים תמיד לא אחידים, וקצת מרוכזים באמצע. יתר על כן, ברור כי הספירה נעשית, ואחרי יום או יומיים, הצפיפות של כל חור שונה, מה שישפיע על הגילוי. האם יש דרך טובה?

תשובה:
אם אתה משתמש בפיפטה של ​​פסטר, אל תמצץ יותר מדי בכל פעם, מכיוון שהתאים בפיפטה ישקעו אוטומטית, לעתים קרובות מספר התאים בחורים הראשונים הוא גדול, והמתעיית התא לעיתים קרובות אחידה, והנוזל יהיה עקוב אחר מסלול ה- S-Shape.
אם אתה משתמש בפיפטה, יש לעבד ולהסיר את הטיפים כדי להימנע מפגיעה בתאים, כך שבכל פעם שנלקח הנוזל מתאים לבאר. מדויק יותר להוסיף חור אחד לאחד עם קצה. אך שימו לב גם לערבוב המתלים.

כדי להקים קבוצה מקבילה, n חייב להיות גדול מספיק (אתה יכול לחשב אותה).

אל תנער לאחר ציפוי, שכן טלטול יגרום לתאים לצבור לכיוון המרכז. עדיף לקרש פעם אחת.

צלחת תרבית תאים נקבובית Yongyue Medical תמיד ראתה את בקרת האיכות כחיי הארגון, וממשיכה לשיפור מתמיד של התחרותיות הארגונית. החברה תמיד דבקת ברוח הארגון של ציית לחוקים ותקנות, קפדנית עם משמעת עצמית, להיות מקלה, ומעזה לקחת אחריות כסטנדרט בהפעלה, שמירה והרחבת השוק באיכות מעולה ושירות מעולה, ולפגוש את צרכי הלקוחות במידה הגדולה ביותר. ו Win-Win עם הלקוחות הוא יעד הפיתוח שלנו. Yongyue Medical! השותף המהימן שלך. אנו מוכנים לשתף פעולה איתך בכנות כדי ליצור עתיד טוב יותר.